Polipeptyd amyloidowy wysepek u pacjentów z rakiem trzustki i cukrzycą ad

Wszyscy pacjenci z rakiem trzustki byli kachektyczni, a utrata masy ciała w ciągu trzech miesięcy przed rozpoznaniem wynosiła od 6,8 do 8,7 procent. W badaniach tkankowych uzyskano próbki tkanki nowotworowej i sąsiedniej tkanki trzustki z próbek czynnych 7 pacjentów z rakiem trzustki i próbek tkanki trzustkowej od 15 dawców narządów zmarłych. Uzyskaliśmy dowolną historię cukrzycy i przeprowadziliśmy doustny test tolerancji glukozy u wszystkich pacjentów z rakiem trzustki. Pacjentów podzielono na podgrupy zgodnie z kryteriami Światowej Organizacji Zdrowia w odniesieniu do upośledzonej tolerancji glukozy i cukrzycy13.
Próbki krwi pobierano od wszystkich osobników po całonocnym poście i zbierano do schłodzonych w lodzie probówek zawierających aprotyninę (400 jednostek kalikreinowych hamujących na mililitr krwi) i EDTA (5 mg na mililitr krwi). Osocze natychmiast oddzielono w chłodzonej wirówce. Próbki guza i sąsiadującej tkanki trzustki od pacjentów z rakiem trzustki i próbki tkanki trzustki od dawców narządów natychmiast zamrożono w temperaturze -70 ° C do późniejszej ekstrakcji i testu radioimmunologicznego. Próbki do oceny immunohistochemicznej i hybrydyzacji in situ pobrano z trzustki każdego dawcy narządu oraz z guza i sąsiadującej tkanki trzustki bezpośrednio po resekcji u pacjentów poddawanych pankreatektomii. Te próbki tkanki utrwalano przez około sześć godzin w zbuforowanej 10% formalinie i zatopiono w parafinie.
Badania te zostały zatwierdzone przez komitet przeglądowy Uniwersytetu w Linkoping i uzyskano świadomą zgodę wszystkich badanych.
Test radioimmunologiczny dla IAPP
Stężenia IAPP mierzono w ekstraktach z osocza metodą radioimmunologiczną w dwóch powtórzeniach, z zastosowaniem dostępnej komercyjnie surowicy (Peninsula Laboratories, Belmont, CA) i IAPP znakowanej odczynnikiem Boltona i Huntera (Amersham, Arlington Heights, IL) i oczyszczono przez odwrócenie -faza wysokosprawnej chromatografii cieczowej. Czułość testu wynosiła 0,4 fmola na probówkę (co odpowiada 2,0 pmola na litr osocza). Wewnętrzny współczynnik zmienności był mniejszy niż 6 procent, a współczynnik zmienności między testami wynosił mniej niż 10 procent.
Próbki osocza do pomiaru IAPP ekstrahowano pojedynczo na wkładach Sep-Pak z odwróconą fazą C-18 (Waters, Milford, MA) za pomocą wielokanałowych pomp strzykawkowych (Harvard Instruments, Cambridge, Mass.). Wkłady przemyto i następnie poddano eluowaniu 3 ml 60% acetonitrylu zawierającego 0,1% kwasu trifluorooctowego. Eluaty liofilizowano i rekonstytuowano w buforze (60 mM fosforan, pH 7,4, z 0,1% Triton-X 100 i 0,1 procent albuminy bydlęcej) do testu. Odzysk ekstrakcji określono w każdym teście przez dodanie 0, 5 lub 20 fmoli IAPP na mililitr do próbek osocza od 10 normalnych osobników przed ekstrakcją. Zmierzone wartości porównano z wartościami oczekiwanymi, aby określić procent odzysku, który wahał się od 60 do 68 procent. Stężenia IAPP w próbkach eksperymentalnych w każdym teście zostały skorygowane w stosunku do średniego procentu odzysku dla tego testu
[podobne: allegro askas77, dna moczanowa objawy zdjecia, badanie krwi tarczyca cena ]